
FOURTH COMMISSION DIRECTIVE of 5 December 1972 establishing Community methods of analysis for the official control of feedingstuffs (73/46/EEC) (repealed) 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

Article 1 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Article 2 
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Article 3 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Article 4 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
ANNEX I
1. DETERMINATION OF MOISTURE IN ANIMAL AND VEGETABLE FATS AND OILS 
 1. Purpose and Scope 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 2. Principle 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3. Apparatus 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4. Procedure 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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 5. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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Repeatability 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

2. DETERMINATION OF MAGNESIUM 
 1. Purpose and Scope 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 2. Principle 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3. Reagents 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4. Apparatus 
 4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5. Procedure 
 5.1. Preparation of the sample solution 
 5.1.1. Feeding stuffs composed exclusively of mineral substances 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5.1.2. Feeding stuffs composed predominantly of mineral substances 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5.1.3. Feedingstuffs composed predominantly of organic substances 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5.2. Measurement by atomic absorption 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 6. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Repeatability 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

3. DETERMINATION OF CRUDE FIBRE 
 1. Purpose and scope 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 2. Principle 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3. Reagents 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 3.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4. Apparatus 
 4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 4.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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 6. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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 7. Repeatability 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8. Observations 
 8.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 8.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

ANNEX II
1. DETERMINATION OF RETINOL (VITAMIN A) 
 1. Purpose and Scope 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2. Principle 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3. Reagents 
 (a) used for analysing products of Groups A and B 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.8. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.9. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.10. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.11. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.12. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . (b) used exclusively for analysing Group A products 
 3.14. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.15. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.16. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.17. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . (c) used exclusively for analysing Group B products 
 3.18. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4. Apparatus 
 4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5. Procedure 
 5.1. Test Sample 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.2. Hydrolysis and extraction 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3. Chromatography 
 5.3.1. Group A products 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3.2. Group B products 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4. Measurement of the optical density 
 5.4.1. Group A products 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.2. Group B products 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Repeatability 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2. DETERMINATION OF THIAMINE (VITAMIN B1, ANEURINE) 
 1. Purpose and Scope 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2. Principle 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3. Reagents 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.8. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.9. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.10. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4. Apparatus 
 4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5. Procedure 
 5.1. Enzymatic hydrolysis 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5.1.1. Reference solution T 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1.2. Solutions A (internal standard) and B (sample) 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.2. Oxidation 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3. Measurement of fluorescence 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Repeatability 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3. DETERMINATION OF ASCORBIC ACID AND DEHYDROASCORBIC ACID 
(VITAMIN C) 1. Purpose and Scope 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2. Principle 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3. Reagents 
 3.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.8. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.9. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.10. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.11. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.12. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.14. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4. Apparatus 
 4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.5. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.6. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.7. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5. Procedure 
 5.1. Extraction 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.2. Oxidation 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3. Reaction with 2,4-dinitrophenylhydrazine and hydrazone extraction 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4. Chromatography on a column 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
 5.4.1. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.5. Thin layer chromatography 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.6. Measurement of the optical density 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.7. Blank test 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6. Calculation of results 

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Repeatability 
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .